hg8868皇冠登录|官方平台

细胞培养——细胞复苏

细胞培养是指从生物体取出组织,分离的原代细胞或细胞系,在体外模拟体内生理环境(无菌,适宜温度,PH值和一定营养条件)等特定的条件下培养,使之生存并生长。细胞培养是生命科学的基础,目前细胞培养工作已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域。

细胞培养是指从生物体取出组织,分离的原代细胞或细胞系,在体外模拟体内生理环境(无菌,适宜温度,PH值和一定营养条件)等特定的条件下培养,使之生存并生长。细胞培养是生命科学的基础,目前细胞培养工作已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域。

这期主题主要围绕细胞培养,向大家简单介绍细胞培养相关的一些内容,如细胞培养的具体流程、细胞培养所需的条件、细胞培养的注意事项及问题分析等。细胞培养的具体流程主要分为:细胞复苏、细胞传代、细胞冻存。


本期让我们先来了解一下

——关于细胞复苏的相关内容

一、什么是细胞复苏?

细胞复苏是将休眠的细胞重新活化,使之重新生长进入细胞周期,进而分裂产生子细胞的过程。

二、细胞复苏的实验操作步骤

1、从液氮罐或-80℃冰箱中取出冻存管,用冰盒将其转移至细胞房,迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并不断的摇动,使管中的液体迅速融化。

2、约1-2min后冻存管内液体完全溶解,取出用酒精棉球擦拭或酒精喷洒冻存管的外壁,再拿入超净台内,用移液枪将细胞液转移至含有5mL完全培养基的15mL离心管中,1000rpm离心5min。

3、弃去上清,用1mL完全培养基重悬细胞团块,制备细胞悬液,然后将细胞悬液加进含有4mL完全培养基的细胞培养瓶中,盖上瓶盖混匀。

4、将细胞培养瓶放入37℃、5%CO2培养箱中培养。

注意事项

1.细胞复苏的原则为快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。

2.水浴锅一定要提前预热到37℃。

3.一次性在水浴锅内融化的冻存管不要太多,会导致传热不佳,延长融化时间,对细胞造成损害。

4.实验过程中每次将物品拿进超净台中前,一定要向其喷洒75%酒精消毒,或用酒精棉球擦拭,防止污染,实验全程无菌操作。

5.对于某些细胞比较脆弱,完全培养基需要提前预热后再使用。

发布于:2022-06-14
Baidu
sogou